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皮膚反應(yīng)(致敏)試驗儀

  皮膚反應(yīng)(致敏)試驗儀
 
  一、 儀器介紹
 
  實驗?zāi)康模?/strong>
 
  確定重復(fù)接觸受試物對哺乳動物是否可引起皮膚反應(yīng)及其程度
 
  試驗概述:
 
  局部封閉涂皮試驗(Buehler test,BT)和豚鼠最大值試驗(uinea pig maximisation test,GPMT)是實驗動物通過多次皮膚涂抹(誘導(dǎo)接觸)或皮內(nèi)注射受試物10d~14d(誘導(dǎo)階段)后,給予激發(fā)劑量的受試物,觀察實驗動物,并與對照動物比較對激發(fā)接觸受試物的皮膚反應(yīng)強(qiáng)度。
 
  小鼠局部淋巴結(jié)分析試驗(locallymph node assay,LLNA)是通過耳部給予實驗動物受試物,引起淋巴結(jié)的淋巴細(xì)胞增生,淋巴細(xì)胞增生與受試物劑量(過敏程度)成比例。利用放射性標(biāo)記方法,測定試驗組與對照組淋巴細(xì)胞的標(biāo)記率,并進(jìn)行對比,獲得刺激指數(shù),評價致敏強(qiáng)度。應(yīng)用范圍
 
  應(yīng)用于科研、農(nóng)業(yè)、衛(wèi)生、教育、霧霾狀態(tài)可吸入顆粒染毒效果研究等各個領(lǐng)域
 
  二、試驗步驟:
 
  1. Buehler TestBT
 
  動物模型:豚鼠
 
  操作步驟:
 
  誘導(dǎo)階段:通過封閉式皮膚涂抹受試物,持續(xù)10-14天。激發(fā)階段:間隔后再次涂抹受試物,觀察皮膚反應(yīng)。
 
  觀察指標(biāo):紅斑、水腫等皮膚炎癥反應(yīng)的強(qiáng)度(主觀評分)
 
  優(yōu)點:
 
  模擬人類皮膚接觸途徑,適用于局部制劑(如化妝品、外用藥物)
 
  無需注射,操作相對溫和。
 
  缺點:
 
  敏感性較低,可能漏檢弱致敏物,依賴主觀評分,存在實驗者偏差。0應(yīng)用場景:傳統(tǒng)化妝品、外用藥品的安全性評估。
 
  2.豚鼠最大值試驗(GPMT)
 
  動物模型:豚鼠
 
  操作步驟:
 
  誘導(dǎo)階段:皮內(nèi)注射受試物(常聯(lián)合弗氏佐劑)結(jié)合皮膚涂抹,持續(xù)10-14天。
 
  激發(fā)階段:再次涂抹受試物,評估皮膚反應(yīng)。
 
  觀察指標(biāo):與BT類似,但反應(yīng)更強(qiáng)烈(紅斑、水腫、硬結(jié))
 
  優(yōu)點:
 
  敏感性高,可檢測強(qiáng)致敏物和弱致敏物;
 
  國際的“金標(biāo)準(zhǔn)”,尤其適用于化學(xué)品和工業(yè)原料。
 
  缺點:
 
  使用佐劑可能引發(fā)過度免疫反應(yīng),導(dǎo)致假陽性;
 
  動物痛苦程度較高,倫理爭議較大。
 
  應(yīng)用場景:工業(yè)化學(xué)品、強(qiáng)致敏性物質(zhì)(如染發(fā)劑、橡膠添加劑)的嚴(yán)格檢測。
 
  3.小鼠局部淋巴結(jié)試驗(LLNA)
 
  動物模型:小鼠.
 
  操作步驟:
 
  誘導(dǎo)階段:連續(xù)3天耳部涂抹受試物。
 
  檢測指標(biāo):通過3H-胸苷或BrdU標(biāo)記增殖的淋巴細(xì)胞,計算刺激指數(shù)(SI)觀察指標(biāo):淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞增殖程度(SI>3判為陽性)
 
  優(yōu)點:
 
  客觀定量:減少主觀評分誤差;
 
  符合3R原則:動物用量少,無需激發(fā)階段,痛苦小;
 
  高效快速:試驗周期短(約1周)。
 
  缺點:
 
  對某些物質(zhì)(如金屬鹽)敏感性不足,需使用放射性物質(zhì)或特殊設(shè)備,成本較高。
 
  應(yīng)用場景:歐盟等法規(guī)優(yōu)先推薦的替代方法,廣泛用于藥品、化妝品及化工產(chǎn)品的初篩。
 
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